血清是藥物代謝研究、毒理學(xué)評(píng)價(jià)、脂質(zhì)組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)及高精度細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用最為廣泛的生物基質(zhì)。在科研實(shí)踐中，血清內(nèi)高豐度白蛋白（Albumin, ALB）是引發(fā)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)偏差、重復(fù)性不佳、質(zhì)譜基線噪音過高等問題的核心基質(zhì)干擾因素。常規(guī)天然血清無法有效規(guī)避上述內(nèi)源蛋白干擾，極大限制了生物分析的精準(zhǔn)度與可靠性。因此，定向去除血清中的高豐度白蛋白雜質(zhì)，是開展高精度生物分析實(shí)驗(yàn)的重要前提與關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié)。IPHASE作為體外研究生物試劑引-領(lǐng)者，采用硫酸鹽沉淀（Ammonium Sulfate Precipitation，ASP）法，特異性去除食蟹猴猴血清和人血清中的白蛋白，保留其它關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)成分。

01    血清白蛋白的基質(zhì)干擾機(jī)制

白蛋白（Albumin, ALB），又稱清蛋白，是由肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成并分泌至血液中的非糖基化單一多肽鏈蛋白質(zhì)，隸屬于水溶性蛋白質(zhì)家族，主要從血清中分離提取獲得，是血漿總蛋白中占比最高的組分（50%~60%）。健康人體血漿中，白蛋白正常濃度范圍為35~55g/L，分子量約為66kDa，成熟分子由585個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成，富含α螺旋結(jié)構(gòu)（占比約67%），其心形三級(jí)結(jié)構(gòu)通過34個(gè)半胱氨酸形成的二硫鍵維持穩(wěn)定，剩余1個(gè)自由半胱氨酸殘基則構(gòu)成血漿中主要的硫醇庫，承擔(dān)著抗氧化與解毒的基礎(chǔ)功能。

白蛋白為血清中含量最高的蛋白質(zhì)組分，占血清總蛋白比例達(dá)50%~60%。高豐度白蛋白會(huì)顯著遮蔽低豐度目標(biāo)蛋白、小分子藥物及脂質(zhì)代謝物的檢測(cè)信號(hào)，嚴(yán)重降低色譜、質(zhì)譜檢測(cè)靈敏度，極易引發(fā)信號(hào)抑制、峰形異常、定量偏差等技術(shù)問題。同時(shí)，大量?jī)?nèi)源白蛋白的存在會(huì)改變血清基質(zhì)整體理化環(huán)境，且白蛋白可與體內(nèi)游離脂肪酸（Fatty Acid, FA）發(fā)生可逆性結(jié)合，留存于血清體系中的結(jié)合態(tài)與游離態(tài)脂肪酸，會(huì)持續(xù)干擾脂質(zhì)代謝分析、激素定量檢測(cè)、藥物結(jié)合特性評(píng)價(jià)及細(xì)胞培養(yǎng)體系穩(wěn)定性，是造成實(shí)驗(yàn)批次差異、數(shù)據(jù)難以復(fù)現(xiàn)的重要誘因。

在藥理毒理研究、非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)、臨床前藥物有效性與安全性評(píng)價(jià)等高-端科研場(chǎng)景中，血清基質(zhì)純度直接決定實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的真實(shí)性與結(jié)論可信度。常規(guī)天然血清僅可滿足基礎(chǔ)培養(yǎng)與定性觀測(cè)需求，無法適配高精度、高靈敏度的定量分析實(shí)驗(yàn)，去除血清內(nèi)源性白蛋白雜質(zhì)，已成為現(xiàn)代精準(zhǔn)生物醫(yī)藥研究的標(biāo)準(zhǔn)化前置需求。

02    IPHASE制備工藝及產(chǎn)品

現(xiàn)階段主流血清除雜工藝存在明顯技術(shù)短板：?jiǎn)我怀恋砉に嚾コ椎鞍准兌扔邢蓿s蛋白殘留較高；傳統(tǒng)色譜純化流程復(fù)雜、處理周期長(zhǎng)，易造成基質(zhì)有效組分損耗，批次穩(wěn)定性較差；商業(yè)化純化試劑盒普遍成本較高、適配場(chǎng)景有限，難以同時(shí)滿足人源與食蟹猴源血清的標(biāo)準(zhǔn)化去白蛋白需求，無法適配規(guī)?；?、高通量的科研實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景。

針對(duì)行業(yè)現(xiàn)存技術(shù)痛點(diǎn)與科研高精度應(yīng)用需求，IPHASE依托完-善的蛋白純化技術(shù)體系，完成血清去蛋白工藝的迭代升級(jí)，成功研發(fā)并量產(chǎn)去除白蛋白人血清（Albumin Depleted Human Serum）、去除白蛋白食蟹猴血清（Albumin Depleted Cynomolgus Monkey Serum）、去除白蛋白及脂肪酸人血清（ALB&FA Depleted Human Serum）及去除白蛋白及食蟹猴血清（ALB&FA Depleted Cynomolgus Monkey Serum）等四項(xiàng)產(chǎn)品，有效解決傳統(tǒng)血清基質(zhì)的白蛋白及脂肪酸干擾問題，為各類高精度生物分析實(shí)驗(yàn)提供高純度、高穩(wěn)定性的標(biāo)準(zhǔn)化生物基質(zhì)。

IPHASE深耕體外生物試劑研發(fā)與生產(chǎn)領(lǐng)域，基于成熟的蛋白分離純化技術(shù)，建立了標(biāo)準(zhǔn)化、可復(fù)刻、高適配的血清白蛋白去除工藝體系，兼顧白蛋白去除效率、血清基質(zhì)完整性與批次一致性。本工藝以標(biāo)準(zhǔn)化硫酸銨沉淀（Ammonium Sulfate Precipitation，ASP）技術(shù)為基礎(chǔ)，通過精準(zhǔn)調(diào)控鹽析濃度梯度，實(shí)現(xiàn)血清中高豐度白蛋白與雜蛋白的高效分離，完成白蛋白的初步去除，同步清除大部分大分子雜質(zhì)。該工藝條件溫和，可完整保留血清基質(zhì)的基礎(chǔ)理化特性與有效活性組分，具備工藝穩(wěn)定、重復(fù)性強(qiáng)、適配性廣的特點(diǎn)；進(jìn)一步采用凝膠過濾純化技術(shù)，依據(jù)分子量差異實(shí)現(xiàn)殘余白蛋白與小分子雜質(zhì)的高效分離，深度脫除殘留白蛋白組分，顯著提升血清基質(zhì)純凈度。該精制工藝作用溫和、特異性強(qiáng)，可最-大程度保留血清基質(zhì)中的功能性活性組分，保障基質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的完整性。最后，所有去白蛋白血清產(chǎn)品均經(jīng)過嚴(yán)格的電泳純度驗(yàn)證與質(zhì)譜質(zhì)控檢測(cè)。電泳結(jié)果顯示，純化后產(chǎn)品目標(biāo)條帶與陽性參比分子量一致，白蛋白去除效果-顯著。

除此以外，IPHASE技術(shù)人員在硫酸銨沉淀法分離白蛋白的基礎(chǔ)工藝之上，進(jìn)一步采用活性炭吸附法（Fatty Acid, FA），以精準(zhǔn)去除脂肪酸，有效解決傳統(tǒng)血清基質(zhì)的白蛋白及脂肪酸干擾問題，去除白蛋白及脂肪酸人血清（ALB&FA Depleted Human Serum）及去除白蛋白及食蟹猴血清（ALB&FA Depleted Cynomolgus Monkey Serum），且該系列產(chǎn)品均經(jīng)過質(zhì)譜檢測(cè)驗(yàn)證，確保產(chǎn)品性能達(dá)標(biāo)。如下圖所示，IPHASE技術(shù)人員典型內(nèi)源脂肪酸FA18:1為檢測(cè)指標(biāo)，其中藍(lán)色曲線代表去除前白蛋白結(jié)合FA18:1的檢測(cè)結(jié)果，粉色曲線代表去除后的檢測(cè)結(jié)果，可清晰觀察到，在保留時(shí)間（RT）為2.435min時(shí)，F(xiàn)A18:1的去除率＞97%，雜質(zhì)去除效果優(yōu)異，可有效消除內(nèi)源性脂肪酸與白蛋白帶來的基質(zhì)干擾，幾乎滿足各類高精度定性與定量生物分析實(shí)驗(yàn)要求。

總之，生物基質(zhì)的純度與穩(wěn)定性是決定精準(zhǔn)科研實(shí)驗(yàn)質(zhì)量的核心基礎(chǔ)。IPHASE依托成熟的蛋白純化技術(shù)體系、優(yōu)化的雙重除雜工藝以及嚴(yán)苛的質(zhì)譜質(zhì)控體系，成功開發(fā)高純度、低干擾、高一致性的去白蛋白、去脂肪酸血清系列產(chǎn)品，有效解決了傳統(tǒng)血清基質(zhì)的內(nèi)源干擾難題，可為各類高精度生物分析、臨床前藥理毒理研究及組學(xué)研究提供穩(wěn)定可靠的基質(zhì)支撐，助力生物醫(yī)藥科研工作提質(zhì)增效、精準(zhǔn)產(chǎn)出科研成果。

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